DOTAP--脂質體制備中使用的陽離子脂質材料

 陽離子脂質體作為如今火熱的研究方向之一，如何選擇制備材料是我們需要了解的首要部分。本期AVT小編要介紹的即是在陽離子脂質體制備中使用***多的DOTAP。

 根據包載的API不同，可將陽離子脂質體分為兩大類，一類是包載以mRNA、siRNA為**的核酸類藥物的脂質體，是基因**中研究***多、應用***廣的一種非病毒載體；另一類是包載如紫杉醇、喜樹堿等小分子**藥的脂質體制劑，具有**新生血管靶向性，對**也有雙重機制作用下的好療效。DOTAP是在陽離子脂質體制備中使用***多的藥用輔料。

 常見的DOTAP（Cl），分子式C₄₂H₈₀NO₄Cl，分子量698.6，是一種季銨鹽，是帶正電荷的兩親性類脂化合物。因為生產工藝的不同，有些性狀呈淡黃色蠟狀，而工藝好的公司生產的DOTAP則是白色粉末，更便于稱量等實際操作。它是兩親分子，結構主要由極性頭部(親水基團)、連接基團、疏水尾部三部分組成。極性頭部通常由叔胺或季銨鹽構成，后來又研究出咪唑頭部、氨基酸頭部等。其極性頭部情況對核酸分子的包載效率以及細胞毒性均有重要的影響。因含雙鍵和正電荷，DOTAP光敏易氧化易吸濕，氧化后會發黃、變黏，因此實驗時操作需快。

 DOTAP***早應用的商業化產品是轉染試劑。DOTAP的極性頭部通過靜電作用與帶有負電荷的DNA分子穩定結合，兩者混合后可自發形成穩定的復合物。這種轉染方法非常溫和，可避免脂質轉染或者其它方式轉染帶來的細胞毒性作用，并且轉染效率高于其它的脂質試劑。

 對于核酸藥物脂質體而言，**中DOTAP用量越大載藥量及轉染效率自然越高，但隨之而來細胞毒性也越大，制劑安全性受影響，因此兩者需平衡。學術部的同事曾做過小鼠實驗研究即毒性：當zeta電位高于+50mV時即有可能出現注射立即死亡現象。對于包載化療藥物而言，載藥并不依賴DOTAP，**中可添加其它中性磷脂如DSPC、DPPC等，使用劑量方面受限較小。

 應用方面，DOTAP價格相對其它種類陽離子脂質而言較低，性價比高，是應用***多的陽離子脂質，已在人體上使用——正在進行III期臨床試驗EndoTAG-1。

 EndoTAG-1是將紫杉醇包埋于帶正電荷的脂質體中所得的陽離子脂質體。**如下：

 與正常脈管系統不同，**內皮由于缺乏糖蛋白涂層，進而會形成具有較大負電荷的細胞表面。EndoTag-1可選擇性吸附于帶負電荷的新生**血管內皮細胞上，即只破壞新生血管，不攻擊健康血管。而血管內皮細胞是生長不可少的，因此EndoTAG-1除了API紫杉醇發揮**作用外還因DOTAP提供的正電荷抑制**新生血管生成，雙重機制作用，可有效抑制**生長。其目前處于全球性的胰腺癌及三陰性乳腺癌III期臨床階段，由中國臺灣杏國藥業主導，計劃選擇10個國jia/地區進行，現已成功開展：美國、中國臺灣地區、法國、匈牙利、南韓、俄羅斯、以色列等七個國jia及地區的III期臨床試驗。在國內，石藥的2類藥“注射用紫杉醇陽離子脂質體"項目也使用的是DOTAP，于2019年獲CFDA批準進行乳腺癌的I期臨床。

 借鑒EndoTag-1我們可建立基于DOTAP陽離子脂質體的技術平臺，包裹各類小分子化療藥物。如喜樹堿藥物陽離子脂質體EndoTag-2，是基于拓撲異構酶I抑制劑原理的新型新生血管靶向劑。DOTAP在小分子化療藥物的陽離子脂質體開發上潛力巨大。